康侨医疗。在使用八连管调配试剂时,由于盖子是半密封状态,盖子中间会隆起,可能会导致试剂洒出,当盖子盖得太紧时,也难以轻松拔开,容易导致试剂溅出,现在可以尝试使用可拆分的封板膜进行密封,这种封板膜具有以下特点:1.使用方便,只需轻轻一撕一贴,即可使用所需的数量。2.密封效果好,转移试剂时不会洒出,3.易撕开,不会造成试剂飞溅洒出。

如果用普通pcr检测不到条带是因为扩增模板量太低造成的,为了提高检测灵敏度和特异性,可以采用巢式pcr。其优点是:1、克服了单次扩增平台期效应的限制,使扩增倍数提高,从而极大的提高了pcr的敏感性;2、由于模板和引物的改变,降低了非特异性反应连续放大进行的可能性,保证了反应的特异性;3、内侧引物扩增的模板是外侧引物扩增的产物,第二阶段反应能否进行,也是对第一阶段反应正确性的鉴定,因引可以保证整个反应的准确性及可行性。

我来回答一下吧:1.T/Acloning这种克隆方式利用的是,一般PCR所用的DNA聚合酶具有在PCR产物3‘端添加一个碱基A的特性,也就是说,实际上常规PCR的产物并不是平末端的,而是有一个突出的A碱基,为了对PCR产物进行高效的克隆,人们开发出了一种专门用于PCR产物克隆的载体T载体,T载体是一个线性化的载体,其末端是一个突出的T,正好与PCR产物上突出的A配对,所谓的T/A克隆就是将带有突出A尾巴的PCR产物与T载体连接,然后转化宿主菌的克隆,这种克隆效率非常高,很容易成功,应用也非常广泛,常用于下游克隆操作前的PCR产物测序鉴定和方便对PCR产物进行酶切处理。
3、酶切鉴定与菌落pcr优缺点比较酶切鉴定需要培养大肠杆菌,抽提质粒后才能进行。缺点是耗时,优点是结果可靠,菌落PCR只需用接种针或小枪头蘸一下菌落或菌液,再接入PCR体系中,通过PCR即可判断目标条带的存在。优点是获得结果快,缺点是可能有假阳性,PCR可以直接以菌落做模板,比较方便,但有时候有假阳性;酶切鉴定需要提取质粒才能酶切,比较费时,且插入片段里不能有所选酶的酶切位点,在片段序列未知时不宜判定,但在序列已知时相对可靠。